99%的研究者都不知道该如何正确地使用移液器！移液器的工作原理是怎样的呢？应该如何校准？做实验时如何可以提高实验结果的精准度呢？这篇文章将系统地给出答案。

移液术语

• 分配：移液样品。

• 调整：调整移液器，使分配的容积在规格范围内。

• 吸入：吸入样本。

• 吹出：完全清空枪头（tips）。

• 校准检查：检查实际分配容积与理论分配容积之间的差值。

• 空气置换移液器：用于水溶性溶液。通过空气置换移液器中、活塞和液体之间仍保留着一定量的空气。

• 正位移移液器：用于高粘度和挥发性液体。在正位移液器中，活塞与液体直接接触。

空气位移移液管如何工作？

• 设置容积时，活塞将移动到适当的位置。

• 当操作按钮按下第一档时，活塞会排出音量设置上指示的相同空气量。

• 将尖端浸入液体后，操作按钮被释放。这会产生部分真空，并吸入指定体积的液体进入尖端。

• 当操作按钮再次按下第一档时，进入枪头尖端的液体不会完全吹出。要完全清空尖端，需要将按钮将按下到第二档。

影响空气置换移液器精度的因素：

温度：移液精度最重要的因素是液体温度。下图显示了液体温度与移液器和空气不同的时体积的变化。如果液体、移液器和空气的温度相同，则精度不会受到显著影响。

密度：密度是液体的质量/体积比。密度根据温度和气压而变化。通常，水的密度为0.996千克/dm3，乙醇为0.79千克/dm3，硫酸（H2SO4）为1.85千克/dm3。

高度：地理高度通过气压影响精度。高海拔时气压降低，转换系数Z降低。一些液体的沸点也可以变化到非常接近室温，急剧增加蒸发损失。

正位移移液器

正位移移液器常用于PCR和其他DNA扩增技术等应用。正位移液器中使用的微注射器尖端是一次性的。这有助于避免样品对样品的交叉污染，以及气溶胶效应造成的污染。

正位移移液器如何工作？

• 设置容积时，活塞将移动到适当的位置。

• 当操作按钮按下停止时，活塞下降到枪头开口。

• 将枪头尖端浸入液体中后，释放操作按钮。然后升起柱塞并创建部分真空。这会导致液体进入枪头。

• 再次按下操作按钮时，活塞下降，将液体从枪头排出。

移液使用的一般原则

• 在工作日开始时检查移液器，有无灰尘和污垢在外。如果需要，用70%乙醇擦拭。

• 将容积设置为移液器指定的范围内。

• 握住移液器，让"紧握手指休息"放在食指上。

• 为了最大限度地提高精度，移液器、尖端和液体应处于相同的温度。

• 为确保准确性，仅使用由无污染聚丙烯制成的高质量枪头。

• 高质量枪头专为一次使用而设计，不应对它们进行清洁以重复使用，因为它们的计量特征将不再可靠。

• 预冲洗（1-3次）可以提高移液的准确性，尤其是当使用正位移移液器时。

• 当枪头有液体时，避免将移液器倒置。液体可能会进入移液器的内部，污染移液器。

• 使用尖端弹出器和手套避免手指受到污染。

• 不使用时，将移液器存放在直立位置，如挂在移液器支架上。

• 根据使用频率和应用，定期检查校准，但每年至少检查一次。如果每天使用，建议间隔三个月检查一次。具体操作请按照制造商说明手册中的重新校准说明进行操作。

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